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| Dissertation / PhD Thesis/Book | PreJuSER-34463 |
1999
Forschungszentrum, Zentralbibliothek
Jülich
Please use a persistent id in citations: http://hdl.handle.net/2128/20555
Report No.: Juel-3719
Abstract: Die partikuläre Guanylatzyklase ROS-GC1 ist die vorherrschende Isoform der Guanylatzyklase in den Photorezeptoraußensegmenten der Wirbeltiere (ROS-GC) . Sie ist eines der zentralen Elemente in der Signaltransduktionskaskade der Lichtantwort . Die ROS-GC1 ist das Prototyp-Protein der neuronalen Unterfamilie der partikulären Guanylatzyklasen . Ihre Regulation durch das Cal+-Sensorprotein GCAP-1 erfolgt durch einen neuartigen, noch unverstandenen Mechanismus. In der vorliegenden Arbeit wurden durch die Durchmusterung einer Peptidbibliothek, die ausgewählte Domänen der ROS-GC1 abbildet, Regionen identifiziert, die eine Funktion für die Cal+-abhängige Regulation durch GCAP-1 haben . Zwei dieser Regionen (4501 - L512 , repräsentiert durch das Peptid # 5, und D563 - R574, repräsentiert durch das Peptid #36) wurden durch Peptid- und Mutagenesestudien genauer charakterisiert. Diese beiden Regionen sind Teile der Juxtamembrandomäne der ROS-GC1 und sind damit in der Primärstruktur mehr als 300 AS von der katalytischen Domäne entfernt . Die Deletion dieser Regionen führt zu einer erheblich reduzierten Aktivität der ROS-GC1 ; eine Aktivierung der entsprechenden Mutanten durch GCAP-1 ist kaum noch (# 5) bzw . nicht mehr (#36) möglich. Im Rahmen eines vorgeschlagenen Modells für die Regulation der ROS-GC1 werden für die beiden Regionen aufgrund aller erhaltenen Ergebnisse die folgenden Funktionen postuliert: • Die Region M501 - L512 (# 5) verankert die ROS-GC1 an Elementen des Zytoskeletts, wahrscheinlich an Tubulin . Diese Verankerung ist notwendig, damit die Cal+-abhängigen Konformationsänderungen von GCAP-1 im funktionellen Komplex der ROS-GC1 auf die katalytische Domäne übertragen werden können. • Die Region D563 - R574 (#36) ist als wahrscheinliche Dimerisierungsregion ein zentrales Strukturelement im funktionellen Komplex der ROS-GC1 . Wahrscheinlich bildet diese Region auch einen Teil einer Kontaktoberfläche für GCAP-1 .
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